BspQI
BspQI ને E. coli માં પુનઃસંયોજિત રીતે વ્યક્ત કરી શકાય છે જે ચોક્કસ સાઇટ્સને ઓળખી શકે છે અને તે હેઠળ ઉત્પન્ન થાય છે.
BspQI, એક IIs પ્રતિબંધ એન્ડોન્યુક્લીઝ પ્રતિબંધ એન્ડોન્યુક્લીઝ, એક રિકોમ્બિનન્ટ E. કોલી સ્ટ્રેઈનમાંથી ઉતરી આવ્યો છે જે બેસિલસ સ્ફેરિકસમાંથી ક્લોન કરેલ અને સંશોધિત BspQI જનને વહન કરે છે.તે ચોક્કસ સાઇટ્સને ઓળખી શકે છે, અને ઓળખ ક્રમ અને ક્લીવેજ સાઇટ્સ નીચે મુજબ છે:
5' · · · · GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
ઉત્પાદનના લક્ષણો
1. ઉચ્ચ પ્રવૃત્તિ, ઝડપી પાચન;
2. ઓછી સ્ટાર પ્રવૃત્તિ, "સ્કેલ્પેલ" જેવા ચોક્કસ કટીંગની ખાતરી કરવી;
3. BSA વિના અને પ્રાણી-મૂળ મુક્ત;
મેથિલેશન સંવેદનશીલતા
Dહું મેથિલેશન:સંવેદનશીલ નથી;
Dસેમી મેથિલેશન:સંવેદનશીલ નથી;
CpG મેથિલેશન:સંવેદનશીલ નથી;
સંગ્રહ શરતો
ઉત્પાદન મોકલવું જોઈએ ≤ 0℃;-25~- 15℃ સ્થિતિમાં સ્ટોર કરો.
સંગ્રહ બફર
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM dithiothreitol, 500 µg/ml રિકોમ્બિનન્ટ આલ્બ્યુમિન, 0. 1% ટ્રિશન X- 100 અને 50% ગ્લિસરોલ (pH 7.0 @ 25°C).
એકમ વ્યાખ્યા
એક એકમને 50 μL ના કુલ પ્રતિક્રિયાના જથ્થામાં 50°C પર 1 કલાકમાં 1µg આંતરિક નિયંત્રણ DNAને પચાવવા માટે જરૂરી એન્ઝાઇમની માત્રા તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવે છે.
ગુણવત્તા નિયંત્રણ
પ્રોટીન શુદ્ધતા એસે (SDS-PAGE):BspQI ની શુદ્ધતા SDS-PAGE વિશ્લેષણ દ્વારા ≥95% નક્કી કરવામાં આવી હતી.
RNase:50℃ પર 4 કલાક માટે 1.6μg MS2 RNA સાથે BspQI નું 10U એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દ્વારા નિર્ધારિત કોઈ અધોગતિ પેદા કરતું નથી.
બિન-વિશિષ્ટ DNase પ્રવૃત્તિ:BspQI નું 10U 1μg λ DNA સાથે 16 કલાક માટે 50℃ પર, 1hour માટે 50℃ ની સરખામણીમાં, એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દ્વારા નિર્ધારિત કોઈ વધારાનું DNA મળતું નથી.
લિગેશન અને રિકટિંગ:10U BspQI સાથે 1 μg λDNA ના પાચન પછી, DNA ટુકડાઓ T4 DNA ligase સાથે 16ºC પર બંધ કરી શકાય છે.અને આ બંધાયેલા ટુકડાને BspQI વડે ફરીથી કાપી શકાય છે.
ઇ. કોલી ડીએનએ: E. coli 16s rDNA-વિશિષ્ટ TaqMan qPCR શોધ દર્શાવે છે કે E.coli જીનોમ અવશેષ ≤ 0.1pg/ul.
યજમાન પ્રોટીન અવશેષો:≤ 50 પીપીએમ
બેક્ટેરિયલ એન્ડોટોક્સિન: LAL-પરીક્ષણ, ચાઇનીઝ ફાર્માકોપીયા IV 2020 આવૃત્તિ અનુસાર, જેલ મર્યાદા પરીક્ષણ પદ્ધતિ, સામાન્ય નિયમ (1143).બેક્ટેરિયલ એન્ડોટોક્સિન સામગ્રી ≤10 EU/mg હોવી જોઈએ.
પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ અને શરતો
| ઘટક | વોલ્યુમ |
| BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
| ડીએનએ | 1 μg |
| 10 x BspQ I બફર | 5 μL |
| dd H2O | 50 μL સુધી |
પ્રતિક્રિયા શરતો: 50℃, 1~ 16 કલાક.
ગરમી નિષ્ક્રિયતા: 20 મિનિટ માટે 80°C.
ભલામણ કરેલ પ્રતિક્રિયા પ્રણાલી અને શરતો પ્રમાણમાં સારી એન્ઝાઇમ પાચન અસર પ્રદાન કરી શકે છે, જે ફક્ત સંદર્ભ માટે છે, કૃપા કરીને વિગતો માટે પ્રાયોગિક પરિણામોનો સંદર્ભ લો.
ઉત્પાદન એપ્લિકેશન
એન્ડોન્યુક્લીઝ પાચન પર પ્રતિબંધ, ઝડપી ક્લોનિંગ.
નોંધો
1. એન્ઝાઇમનું પ્રમાણ ≤ પ્રતિક્રિયાના જથ્થાના 1/10.
2. જ્યારે ગ્લિસરોલ સાંદ્રતા 5% થી વધુ હોય ત્યારે સ્ટાર પ્રવૃત્તિ થઈ શકે છે.
3. જ્યારે સબસ્ટ્રેટ ભલામણ કરેલ ગુણોત્તરથી નીચે હોય ત્યારે ક્લીવેજ પ્રવૃત્તિ થઈ શકે છે.
