વન સ્ટેપ ફાસ્ટ RT-qPCR પ્રોબ પ્રિમિક્સ-UNG
કેટ નંબર: HCR5143A
વન સ્ટેપ RT-qPCR પ્રોબ કિટ (ફાસ્ટ માટે) એ પ્રોબ-આધારિત RT-qPCR ફાસ્ટ ડિટેક્શન કિટ છે જે સિંગલ-પ્લેક્સ અથવા મલ્ટીપ્લેક્સ ક્વોન્ટિટેટિવ PCR માટે RNA નો ટેમ્પલેટ તરીકે ઉપયોગ કરે છે (જેમ કે RNA વાયરસ).આ ઉત્પાદન એન્ટિબોડી-સંશોધિત Taq DNA પોલિમરેઝ અને વન-સ્ટેપ ડેડિકેટેડ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસની નવી પેઢીનો ઉપયોગ કરે છે, જેમાં ઝડપી એમ્પ્લીફિકેશન માટે ઑપ્ટિમાઇઝ બફર છે, જેમાં ઝડપી એમ્પ્લીફિકેશન ઝડપ, ઉચ્ચ એમ્પ્લીફિકેશન કાર્યક્ષમતા અને વિશિષ્ટતા છે.તે ટૂંકા સમયમાં ઓછા અને ઉચ્ચ સાંદ્રતાના નમૂનાઓના સિંગલ-પ્લેક્સ અને મલ્ટિપ્લેક્સ બંનેમાં સંતુલિત એમ્પ્લીફિકેશનને સપોર્ટ કરે છે.
ઘટકો
1. 5×RT-qPCR બફર (U+)
2. એન્ઝાઇમ મિશ્રણ (U+)
નોંધો:
a5×RT-qPCR બફર (U+)માં dNTP અને Mgનો સમાવેશ થાય છે2+;
bએન્ઝાઇમ મિક્સ (U+)માં રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ, હોટ સ્ટાર્ટ ટાક ડીએનએ પોલિમરેઝ, આરનેઝ ઇન્હિબિટર અને યુડીજીનો સમાવેશ થાય છે;
cRNase-ફ્રી ટીપ્સ, EP ટ્યુબ વગેરેનો ઉપયોગ કરો.
ઉપયોગ કરતા પહેલા, 5×RT-qPCR બફર (U+) ને સારી રીતે મિક્સ કરો.જો પીગળ્યા પછી કોઈ વરસાદ હોય, તો બફર ઓરડાના તાપમાને પાછા ફરે ત્યાં સુધી રાહ જુઓ, મિશ્રણ કરો અને ઓગળી જાઓ અને પછી તેનો સામાન્ય રીતે ઉપયોગ કરો.
સંગ્રહ શરતો
ઉત્પાદન સૂકા બરફ સાથે મોકલવામાં આવે છે અને 1 વર્ષ માટે -25~-15℃ પર સંગ્રહિત કરી શકાય છે.
સૂચનાઓ
1. પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ
| ઘટકો | વોલ્યુમ (20 μL પ્રતિક્રિયા) |
| 2 ×RT-qPCR બફર | 4μL |
| એન્ઝાઇમ મિશ્રણ (U+) | 0.8μL |
| પ્રાઈમર ફોરવર્ડ | 0.1~ 1.0μM |
| પ્રાઈમર રિવર્સ | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan પ્રોબ | 0.05~0.25μM |
| ઢાંચો | X μL |
| RNase-મુક્ત પાણી | 25μL સુધી |
નોંધો: પ્રતિક્રિયા વોલ્યુમ 10-50μL છે.
2. સાયકલિંગ પ્રોટોકોલ (એસટેન્ડર)
| સાયકલ પગલું | ટેમ્પ. | સમય | સાયકલ |
| રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન | 55 ℃ | 10 મિનિટ | 1 |
| પ્રારંભિક વિકૃતિકરણ | 95 ℃ | 30 સે | 1 |
| વિકૃતિકરણ | 95 ℃ | 10 સે | 45 |
| એનીલિંગ/એક્સ્ટેંશન | 60 ℃ | 30 સે |
| સાયકલિંગ પ્રોટોકોલ (ઝડપી) સાયકલ પગલું |
ટેમ્પ. |
સમય |
સાયકલ |
| રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન | 55 ℃ | 5 મિનિટ | 1 |
| પ્રારંભિક વિકૃતિકરણ | 95 ℃ | 5 સે | 1 |
| વિકૃતિકરણ | 95 ℃ | 3 સે | 43 |
| એનીલિંગ/એક્સ્ટેંશન | 60 ℃ | 10 સે |
નોંધો:
aરિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન તાપમાન 50℃ થી 60℃ ની વચ્ચે હોય છે, તાપમાનમાં વધારો જટિલ માળખાં અને ઉચ્ચ CG સામગ્રી ટેમ્પલેટ્સને વિસ્તૃત કરવામાં મદદ કરે છે;
bપ્રાઈમરના Tm મૂલ્યના આધારે શ્રેષ્ઠ એન્નીલિંગ તાપમાનને સમાયોજિત કરવાની જરૂર છે, અને રીઅલ ટાઈમ પીસીઆર સાધનના આધારે ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલ સંગ્રહ માટે સૌથી ઓછો સમય પસંદ કરો.
નોંધો
કૃપા કરીને તમારા સ્વાસ્થ્ય અને સલામતીની ખાતરી કરવા માટે જરૂરી PPE, જેમ કે લેબ કોટ અને મોજા પહેરો!
