અલ્ટ્રા ન્યુક્લિઝ
અલ્ટ્રાન્યુક્લીઝ એ સેરેટિયા માર્સેસેન્સમાંથી ઉતરી આવેલ આનુવંશિક રીતે એન્જિનિયર્ડ ડેન્ડોન્યુક્લીઝ છે, જે ડીએનએ અથવા આરએનએને ડિગ્રેડ કરવા સક્ષમ છે, કાં તો ડબલ અથવા સિંગલ સ્ટ્રેન્ડેડ, રેખીય અથવા ગોળાકાર સ્થિતિની વિશાળ શ્રેણી હેઠળ, ન્યુક્લીક એસિડને સંપૂર્ણપણે 5'-મોનોફોસ્ફેટ ઓલિગોન્યુક્લીઝ-3 સાથે 5'-મોનોફોસ્ફેટમાં ડિગ્રેડ કરે છે. .આનુવંશિક ઇજનેરી ફેરફાર પછી, ઉત્પાદનને એસ્ચેરીચિયા કોલી (ઇ. કોલી) માં આથો, અભિવ્યક્ત અને શુદ્ધ કરવામાં આવ્યું હતું, જે સેલ સુપરનેટન્ટ અને સેલ લિસેટની વિસ્કોસિટી ઘટાડે છે, પરંતુ પ્રોટીનની શુદ્ધિકરણ કાર્યક્ષમતા અને કાર્યાત્મક સંશોધનમાં પણ સુધારો કરે છે.તેનો ઉપયોગ જીન થેરાપી, વાયરસ શુદ્ધિકરણ, રસી ઉત્પાદન, પ્રોટીન અને પોલિસેકરાઇડ ફાર્માસ્યુટિકલ ઉદ્યોગમાં યજમાન અવશેષ ન્યુક્લીક એસિડ રિમૂવલ રીએજન્ટ તરીકે પણ થઈ શકે છે.
ઉત્પાદનના લક્ષણો
CAS નં. | 9025-65-4 |
EC નં. | |
મોલેક્યુલર વજન | 30kDa |
આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ | 6.85 |
પ્રોટીન શુદ્ધતા | ≥99% (SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
ચોક્કસ પ્રવૃત્તિ | ≥1.1×106U/mg |
મહત્તમ તાપમાન | 37°C |
શ્રેષ્ઠ પીએચ | 8.0 |
પ્રોટીઝ પ્રવૃત્તિ | નકારાત્મક |
બાયોબર્ડન | ~10CFU/100,000U |
શેષ યજમાન-સેલ પ્રોટીન | ≤10ppm |
ભારે ઘાતુ | ≤10ppm |
બેક્ટેરિયલ એન્ડોટોક્સિન | ~0.25EU/1000U |
સંગ્રહ બફર | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% ગ્લિસરોલ |
સંગ્રહ શરતો
≤0°C પરિવહન;-25~-15°C સંગ્રહ, 2 વર્ષની માન્યતા (ઠંડી-પીગળવાનું ટાળો).
એકમ વ્યાખ્યા
37 °C પર 30 મિનિટની અંદર △A260 ના શોષણ મૂલ્યને 1.0 દ્વારા બદલવા માટે ઉપયોગમાં લેવાતા એન્ઝાઇમની માત્રા, pH 8.0, ઓલિગોન્યુક્લિયોટાઇડ્સમાં કાપીને પચેલા 37μg સૅલ્મોન શુક્રાણુ ડીએનએની સમકક્ષ, સક્રિય એકમ (U) તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવી હતી.
ગુણવત્તા નિયંત્રણ
શેષ યજમાન-સેલ પ્રોટીન: એલિસા કીટ
•પ્રોટીઝ અવશેષો: 250KU/mL અલ્ટ્રાન્યુક્લીઝે 60 મિનિટ માટે સબસ્ટ્રેટ સાથે પ્રતિક્રિયા આપી, કોઈ પ્રવૃત્તિ મળી નથી.
•બેક્ટેરિયલ એન્ડોટોક્સિન: LAL-ટેસ્ટ, ફાર્માકોપીઆ ઓફ ધ પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઈના વોલ્યુમ 4 (2020 આવૃત્તિ) જેલ મર્યાદા પરીક્ષણ પદ્ધતિ.સામાન્ય નિયમો (1143).
•બાયોબર્ડન: પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઈનાનો ફાર્માકોપીઆ વોલ્યુમ 4 (2020 આવૃત્તિ) — સામાન્ય
સ્ટરિલિટી ટેસ્ટ (1101), PRC નેશનલ સ્ટાન્ડર્ડ, GB 4789.2-2016 માટેના નિયમો.
•ભારે ઘાતુ:ICP-AES, HJ776-2015.
ઓપરેશન
જ્યારે SDS સાંદ્રતા 0.1% અથવા EDTA થી વધુ હતી ત્યારે અલ્ટ્રાન્યુક્લીઝ પ્રવૃત્તિ નોંધપાત્ર રીતે અટકાવવામાં આવી હતી
સાંદ્રતા 1mM કરતાં વધુ હતી. સર્ફેક્ટન્ટ ટ્રાઇટોન X-100, ટ્વિન 20 અને ટ્વીન 80 ની ન્યુક્લિઝ પર કોઈ અસર થઈ નથી
ગુણધર્મો જ્યારે સાંદ્રતા 1.5% થી ઓછી હતી.
ઓપરેશન | શ્રેષ્ઠ કામગીરી | માન્ય કામગીરી |
તાપમાન | 37℃ | 0-45℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2 એમએમ | 1- 15 એમએમ |
ડીટીટી | 0- 100 એમએમ | >100 એમએમ |
2-Mercaptoethanol | 0- 100 એમએમ | >100 એમએમ |
મોનોવેલેન્ટ મેટલ આયન (Na+, K+ વગેરે) | 0-20 એમએમ | 0-200 એમએમ |
PO43- | 0- 10 એમએમ | 0- 100 એમએમ |
ઉપયોગ અને ડોઝ
• રસીના ઉત્પાદનોમાંથી એક્સોજેનસ ન્યુક્લીક એસિડ દૂર કરો, શેષ ન્યુક્લીક એસિડ ઝેરીનું જોખમ ઘટાડે છે અને ઉત્પાદનની સલામતીમાં સુધારો કરે છે.
• ન્યુક્લીક એસિડને કારણે ફીડ લિક્વિડની સ્નિગ્ધતા ઘટાડે છે, પ્રોસેસિંગનો સમય ઓછો કરે છે અને પ્રોટીનની ઉપજમાં વધારો કરે છે.
• ન્યુક્લીક એસિડને દૂર કરો જેણે કણ (વાયરસ, સમાવિષ્ટ શરીર, વગેરે) લપેટી લીધું હતું, જે અનુકૂળ છે.
કણના પ્રકાશન અને શુદ્ધિકરણ માટે.
પ્રાયોગિક પ્રકાર | પ્રોટીન ઉત્પાદન | વાયરસ, રસી | સેલ દવાઓ |
કોષો નંબર | 1 જી સેલ ભીનું વજન (10ml બફર સાથે ફરી સસ્પેન્ડ) | 1L આથો પ્રવાહી સુપરનેટન્ટ | 1L સંસ્કૃતિ |
ન્યૂનતમ ડોઝ | 250U | 100U | 100U |
ભલામણ કરેલ ડોઝ | 2500યુ | 25000યુ | 5000U |
• ન્યુક્લિઝ ટ્રીટમેન્ટ કૉલમ ક્રોમેટોગ્રાફી, ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ અને બ્લોટિંગ વિશ્લેષણ માટે નમૂનાના રિઝોલ્યુશન અને પુનઃપ્રાપ્તિમાં સુધારો કરી શકે છે.
• જનીન ઉપચારમાં, શુદ્ધિકરણ એડિનો-સંબંધિત વાયરસ મેળવવા માટે ન્યુક્લીક એસિડ દૂર કરવામાં આવે છે.