વાયરલ DNA/RNA એક્સટ્રેક્શન કિટ
આ કીટ નાસોફેરિંજલ સ્વેબ્સ, પર્યાવરણીય સ્વેબ્સ, સેલ કલ્ચર સુપરનેટન્ટ્સ અને ટીશ્યુ હોમોજેનેટ સુપરનેટન્ટ્સ જેવા નમૂનાઓમાંથી ઉચ્ચ-શુદ્ધતાવાળા વાયરલ DNA/RNAના ઝડપી નિષ્કર્ષણ માટે યોગ્ય છે.આ કિટ સિલિકા મેમ્બ્રેન પ્યુરિફિકેશન ટેક્નોલોજી પર આધારિત છે જે ઉચ્ચ ગુણવત્તાના વાયરલ DNA/RNA કાઢવા માટે ફિનોલ/ક્લોરોફોર્મ ઓર્ગેનિક સોલવન્ટ્સ અથવા સમય-વપરાશ આલ્કોહોલ વરસાદના ઉપયોગની જરૂરિયાતને દૂર કરે છે.મેળવેલ ન્યુક્લિક એસિડ અશુદ્ધિઓથી મુક્ત છે અને ડાઉનસ્ટ્રીમ પ્રયોગો જેમ કે રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન, પીસીઆર, આરટી-પીસીઆર, રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર, નેક્સ્ટ જનરેશન સિક્વન્સિંગ (એનજીએસ), અને નોર્ધન બ્લોટમાં ઉપયોગ માટે તૈયાર છે.
સંગ્રહ શરતો
15 ~ 25℃ પર સ્ટોર કરો અને ઓરડાના તાપમાને પરિવહન કરો
ઘટકો
| ઘટકો | 100RXNS |
| બફર VL | 50 મિલી |
| બફર RW | 120 મિલી |
| RNase-મુક્ત ddH2 O | 6 મિલી |
| ફાસ્ટપ્યોર આરએનએ કૉલમ | 100 |
| કલેક્શન ટ્યુબ્સ (2ml) | 100 |
| RNase-મુક્ત કલેક્શન ટ્યુબ્સ(1.5ml) | 100 |
બફર VL:લિસિસ અને બાઈન્ડિંગ માટે વાતાવરણ પૂરું પાડો.
બફર RW:શેષ પ્રોટીન અને અન્ય અશુદ્ધિઓ દૂર કરો.
RNase-મુક્ત ddH2O:સ્પિન કોલમમાં પટલમાંથી એલ્યુટ DNA/RNA.
ફાસ્ટપ્યોર આરએનએ કૉલમ્સ:ખાસ કરીને ડીએનએ/આરએનએને શોષી લે છે.
કલેક્શન ટ્યુબ 2 મિલી:ગાળણ એકત્રિત કરો.
RNase-મુક્ત કલેક્શન ટ્યુબ્સ 1.5 મિલી:DNA/RNA એકત્રિત કરો.
અરજીઓ
નાસોફેરિંજલ સ્વેબ્સ, પર્યાવરણીય સ્વેબ્સ, સેલ કલ્ચર સુપરનેટન્ટ્સ અને ટીશ્યુ હોમોજેનેટ સુપરનેટન્ટ્સ.
સ્વ-તૈયાર મેટરials
RNase-ફ્રી પીપેટ ટીપ્સ, 1.5 ml RNase-ફ્રી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, સેન્ટ્રીફ્યુજ, વોર્ટેક્સ મિક્સર અને પાઈપેટ્સ.
પ્રયોગ પ્રક્રિયા
બાયોસેફ્ટી કેબિનેટમાં નીચેના તમામ પગલાં ભરો.
1. RNase-ફ્રી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં નમૂનાના 200 μl ઉમેરો (અપૂરતા નમૂનાના કિસ્સામાં PBS અથવા 0.9% NaCl સાથે બનાવો), 500 μl બફર VL ઉમેરો, 15 - 30 સેકન્ડ માટે વમળ દ્વારા સારી રીતે ભળી દો, અને સેન્ટ્રીફ્યુજ સંક્ષિપ્તમાં ટ્યુબના તળિયે મિશ્રણ એકત્રિત કરો.
2. ફાસ્ટપ્યોર આરએનએ કૉલમને સંગ્રહ ટ્યુબમાં 2 મિલી મૂકો.મિશ્રણને સ્ટેપ 1 થી ફાસ્ટપ્યોર આરએનએ કૉલમ્સમાં સ્થાનાંતરિત કરો, 1 મિનિટ માટે 12,000 rpm (13,400 × g) પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો અને ફિલ્ટ્રેટ કાઢી નાખો.
3. ફાસ્ટપ્યોર આરએનએ કૉલમમાં 600 μl બફર RW ઉમેરો, 30 સેકન્ડ માટે 12,000 rpm (13,400 × g) પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો અને ફિલ્ટ્રેટ કાઢી નાખો.
4. પગલું 3 પુનરાવર્તન કરો.
5. ખાલી સ્તંભને 2 મિનિટ માટે 12,000 rpm (13,400 × g) પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
6. FastPure RNA કૉલમને નવી RNase-ફ્રી કલેક્શન ટ્યુબ 1.5 ml (કીટમાં આપેલી) માં કાળજીપૂર્વક સ્થાનાંતરિત કરો, અને કૉલમને સ્પર્શ કર્યા વિના પટલના મધ્યમાં RNase-ફ્રી ddH2O નું 30 - 50 μl ઉમેરો.ઓરડાના તાપમાને 1 મિનિટ માટે ઊભા રહેવા દો અને 12,000 rpm (13,400 × g) પર 1 મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
7. ફાસ્ટપ્યોર આરએનએ કૉલમ્સ કાઢી નાખો.ડીએનએ/આરએનએનો સીધો ઉપયોગ અનુગામી પરીક્ષણો માટે કરી શકાય છે, અથવા ટૂંકા ગાળા માટે -30~ -15°C અથવા લાંબા સમય માટે -85~-65°C પર સંગ્રહિત કરી શકાય છે.
નોંધો
માત્ર સંશોધન માટે ઉપયોગ.ડાયગ્નોસ્ટિક પ્રક્રિયાઓમાં ઉપયોગ માટે નથી.
1. નમૂનાઓને અગાઉથી ઓરડાના તાપમાને સંતુલિત કરો.
2. વાયરસ અત્યંત ચેપી છે.કૃપા કરીને ખાતરી કરો કે પ્રયોગ પહેલાં તમામ જરૂરી સલામતી સાવચેતીઓ લેવામાં આવી છે.
3. સેમ્પલને વારંવાર ઠંડું અને પીગળવાનું ટાળો, કારણ કે આનાથી એક્સટ્રેક્ટેડ વાયરલ DNA/RNA ની ઉપજમાં ઘટાડો અથવા ઘટાડો થઈ શકે છે.
4. સ્વ-તૈયાર સાધનોમાં RNase-ફ્રી પાઈપેટ ટીપ્સ, 1.5 ml RNase-ફ્રી સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ, સેન્ટ્રીફ્યુજ, વોર્ટેક્સ મિક્સર અને પાઈપેટ્સનો સમાવેશ થાય છે.
5. કીટનો ઉપયોગ કરતી વખતે, લેબ કોટ, નિકાલજોગ લેટેક્સ ગ્લોવ્સ અને નિકાલજોગ માસ્ક પહેરો અને RNase દૂષણના જોખમને ઘટાડવા માટે RNase-મુક્ત ઉપભોજ્ય વસ્તુઓનો ઉપયોગ કરો.
6. ઓરડાના તાપમાને તમામ પગલાંઓ કરો જ્યાં સુધી અન્યથા ઉલ્લેખિત ન હોય.
મિકેનિઝમ અને વર્કફ્લો
