M-MLV નિયોસ્ક્રિપ્ટ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ

નિયોસ્ક્રિપ્ટ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેઝ એ રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્ટેસ છે જે મોલોની મ્યુરિન લ્યુકેમિયા વાયરસની ઉત્પત્તિ અને ઇ.કોલીમાં અભિવ્યક્તિના M-MLV જનીનની મ્યુટેશન સ્ક્રીનીંગ દ્વારા મેળવવામાં આવે છે.એન્ઝાઇમ RNase H પ્રવૃત્તિને દૂર કરે છે, ઉચ્ચ તાપમાન સહનશીલતા ધરાવે છે અને ઉચ્ચ-તાપમાન રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન માટે યોગ્ય છે.તેથી, તે આરએનએ ઉચ્ચ-સ્તરની રચના અને સીડીએનએ સંશ્લેષણ પર બિન-વિશિષ્ટ પરિબળોની પ્રતિકૂળ અસરોને દૂર કરવા માટે મદદરૂપ છે, અને ઉચ્ચ સ્થિરતા અને રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિન્થેસિસ ક્ષમતા ધરાવે છે.એન્ઝાઇમમાં ઉચ્ચ સ્થિરતા અને રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિન્થેસિસ ક્ષમતા હોય છે.

ઘટકો

1.200 U/μL નિયોસ્ક્રિપ્ટ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ

2.5 × ફર્સ્ટ-સ્ટ્રેન્ડ બફર (વૈકલ્પિક)

* 5 × ફર્સ્ટ-સ્ટ્રેન્ડ બફરમાં dNTP નથી, કૃપા કરીને પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ તૈયાર કરતી વખતે dNTP ઉમેરો

ભલામણ કરેલ એપ્લિકેશન

1.વન-સ્ટેપ qRT-PCR.

2.આરએનએ વાયરસ શોધ.

સંગ્રહ સ્થિતિ

લાંબા ગાળાના સંગ્રહ માટે -20 ° સે, ઉપયોગ કરતા પહેલા સારી રીતે મિશ્રિત થવું જોઈએ, વારંવાર ફ્રીઝ-થૉ ટાળો.

એકમ વ્યાખ્યા

એક યુનિટ પોલી(A)•ઓલિગો(dT) નો ઉપયોગ કરીને 37°C પર 10 મિનિટમાં 1 nmol dTTP નો સમાવેશ કરે છે₂₅નમૂના/પ્રાઇમર તરીકે.

ગુણવત્તા નિયંત્રણ

1.SDS-PAGE ઇલેક્ટ્રોફોરેટિક શુદ્ધતા 98% થી વધુ.

2.એમ્પ્લીફિકેશન સંવેદનશીલતા, બેચ-ટુ-બેચ નિયંત્રણ, સ્થિરતા.

3.કોઈ એક્સોજેનસ ન્યુક્લિઝ પ્રવૃત્તિ નથી, કોઈ એક્સોજેનસ એન્ડોન્યુક્લિઝ અથવા એક્સોન્યુક્લિઝ દૂષણ નથી

પ્રથમ સાંકળ પ્રતિક્રિયા ઉકેલ માટે પ્રતિક્રિયા સેટઅપ

1.પ્રતિક્રિયા મિશ્રણની તૈયારી

નોંધો:a/b: કૃપા કરીને તમારી પ્રાયોગિક જરૂરિયાતો અનુસાર વિવિધ પ્રકારના પ્રાઇમર્સ પસંદ કરો.

2.5 મિનિટ માટે 65 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર ગરમ કરો અને 2 મિનિટ માટે બરફ પર ઝડપથી ઠંડુ કરો.

3.ઉપરોક્ત સિસ્ટમમાં નીચેના ઘટકોને 20µL ના કુલ જથ્થામાં ઉમેરો અને હળવા હાથે મિક્સ કરો:

4. કૃપા કરીને નીચેની શરતો અનુસાર પ્રતિક્રિયા કરો:

(1) જો રેન્ડમ પ્રાઈમરનો ઉપયોગ કરવામાં આવે, તો પ્રતિક્રિયા 10 મિનિટ માટે 25℃ અને પછી 30~60 મિનિટ માટે 50℃ પર થવી જોઈએ;

(2) જો ઓલિગો ડીટી અથવા ચોક્કસ પ્રાઇમર્સનો ઉપયોગ કરવામાં આવે, તો પ્રતિક્રિયા 30~60 મિનિટ માટે 50℃ પર થવી જોઈએ.

5.નિયોસ્ક્રિપ્ટ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસને નિષ્ક્રિય કરવા અને પ્રતિક્રિયાને સમાપ્ત કરવા માટે 5 મિનિટ માટે 95℃ પર ગરમ કરો.

6.રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન પ્રોડક્ટ્સનો સીધો ઉપયોગ પીસીઆર પ્રતિક્રિયા અને ફ્લોરોસેન્સ જથ્થાત્મક પીસીઆર પ્રતિક્રિયામાં કરી શકાય છે અથવા લાંબા સમય સુધી -20℃ પર સંગ્રહિત કરી શકાય છે.

પીસીઆર આરક્રિયા:

1.પ્રતિક્રિયા મિશ્રણની તૈયારી

નોંધો:a: જો ખૂબ જ પ્રથમ સાંકળ પ્રતિક્રિયા સોલ્યુશન ઉમેરવામાં આવે, તો PCR પ્રતિક્રિયા અટકાવી શકાય છે.

2.પીસીઆર પ્રતિક્રિયા પ્રક્રિયા

નોંધો

1.42℃~55℃ ની રેન્જમાં રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન તાપમાન ઓપ્ટિમાઇઝેશન માટે યોગ્ય.

2.તે વધુ સારી સ્થિરતા ધરાવે છે, ઉચ્ચ તાપમાન રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન એમ્પ્લીફિકેશન માટે યોગ્ય છે.વધુમાં, તે આરએનએના જટિલ માળખાકીય પ્રદેશોમાંથી અસરકારક રીતે પસાર થવા માટે અનુકૂળ છે.પણ, તેવન-સ્ટેપ મલ્ટિપ્લેક્સ ફ્લોરોસેન્સ જથ્થાત્મક RT-PCR શોધ માટે યોગ્ય છે.

3.વિવિધ PCR એમ્પ્લીફિકેશન એન્ઝાઇમ્સ સાથે સારી સુસંગતતા અને ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા RT-PCR પ્રતિક્રિયાઓ માટે યોગ્ય છે.

4.ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા વન-સ્ટેપ ફ્લોરોસેન્સ જથ્થાત્મક RT-PCR પ્રતિક્રિયા માટે યોગ્ય, ટેમ્પલેટ્સની ઓછી સાંદ્રતાની શોધ દરને અસરકારક રીતે સુધારે છે.

5.સીડીએનએ લાઇબ્રેરી બાંધકામ માટે યોગ્ય.