Bst 2.0 DNA પોલિમરેઝ (ગ્લિસરોલ મુક્ત, ઉચ્ચ ઘનતા)
Bst DNA પોલિમરેઝ V2 એ બેસિલસ સ્ટીરોથર્મોફિલસ DNA પોલિમરેઝ I માંથી ઉતરી આવ્યું છે, જેમાં 5′→3′ DNA પોલિમરેઝ પ્રવૃત્તિ અને મજબૂત સાંકળ રિપ્લેસમેન્ટ પ્રવૃત્તિ છે, પરંતુ 5′→3′ એક્સોનોક્લિઝ પ્રવૃત્તિ નથી.Bst DNA પોલિમરેઝ V2 સ્ટ્રાન્ડ-ડિસ્પ્લેસમેન્ટ, આઇસોથર્મલ એમ્પ્લીફિકેશન LAMP (લૂપ મિડિએટેડ આઇસોથર્મલ એમ્પ્લીફિકેશન) અને ઝડપી સિક્વન્સિંગ માટે આદર્શ રીતે યોગ્ય છે.આ Bst DNA પોલિમરેઝ V2 ઓરડાના તાપમાને DNA પોલિમરેઝ પ્રવૃત્તિને રોકવામાં સક્ષમ છે, જેથી તેને સંચાલિત કરી શકાય અને પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીને ઓરડાના તાપમાને ઘડી શકાય, બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશનને અટકાવી શકાય અને પ્રતિક્રિયાની કાર્યક્ષમતામાં સુધારો કરી શકાય, અને આ સંસ્કરણ lyophilized હોઈ.વધુમાં, તે એલિવેટેડ તાપમાને તેની પ્રવૃત્તિને મુક્ત કરવામાં સક્ષમ છે, આમ અલગ સક્રિયકરણ પગલાની જરૂરિયાતને દૂર કરે છે.
ઘટકો
ઘટક | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst DNA પોલિમરેઝ V2 (ગ્લિસરોલ-ફ્રી) (32U/μL) | 0.05 એમએલ | 0.25 એમએલ | 2.5 એમએલ |
10×HC Bst V2 બફર | 1.5 એમએલ | 2×1.5 એમએલ | 3×10 એમએલ |
MgSO4 (100 એમએમ) | 1.5 એમએલ | 2×1.5 એમએલ | 2×10 એમએલ |
અરજીઓ
1.LAMP ઇસોથર્મલ એમ્પ્લીફિકેશન
2.ડીએનએ સ્ટ્રાન્ડ સિંગલ ડિસ્પ્લેસમેન્ટ પ્રતિક્રિયા
3.ઉચ્ચ GC જનીન સિક્વન્સિંગ
4.નેનોગ્રામ સ્તરની ડીએનએ સિક્વન્સિંગ.
સંગ્રહ સ્થિતિ
0°C થી નીચે પરિવહન અને -25°C~-15°C પર સંગ્રહિત કરવું.
એકમ વ્યાખ્યા
એક એકમ એ એન્ઝાઇમના જથ્થા તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવે છે જે 65 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર 30 મિનિટમાં એસિડ અદ્રાવ્ય સામગ્રીમાં 25 nmol dNTP નો સમાવેશ કરે છે.
LAMP પ્રતિક્રિયા
ઘટકો | 25 μLસિસ્ટમ |
10×HC Bst V2 બફર | 2.5 μL |
MgSO4 (100 એમએમ) | 1.5 μL |
dNTPs (દરેક 10 એમએમ) | 3.5 μL |
SYTO™ 16 લીલો (25×)a | 1.0 μL |
પ્રાઈમર મિશ્રણb | 6 μL |
Bst DNA પોલિમરેઝ V2 (ગ્લિસરોલ-ફ્રી) (32 U/uL) | 0.25 μL |
ઢાંચો | × μL |
ddH₂O | 25 μL સુધી |
નોંધો:
1) એ.SYTOTM 16 ગ્રીન (25×): પ્રાયોગિક જરૂરિયાતો અનુસાર, અન્ય રંગોનો અવેજી તરીકે ઉપયોગ કરી શકાય છે;
2) બી.પ્રાઈમર મિક્સ: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB અને અન્ય વોલ્યુમોના મિશ્રણ દ્વારા મેળવવામાં આવે છે.
પ્રતિક્રિયા અને સ્થિતિ
1 × HC Bst V2 બફર, ઇન્ક્યુબેશન તાપમાન 60°C અને 65°C ની વચ્ચે છે.
ગરમી નિષ્ક્રિયતા
80°C, 20મિનિટ.