હોટસ્ટાર્ટ તાક ડીએનએ પોલિમરેઝ (5u/ul)
Taq DNA પોલિમરેઝ એ એક હોટ સ્ટાર્ટ DNA પોલિમરેઝ છે જેમાં ડબલ એન્ટિબોડીઝ દ્વારા ડબલ બ્લોકિંગ છે. આ ઉત્પાદન માત્ર Taq DNA પોલિમરેઝની 5′→3′ પોલિમરેઝ પ્રવૃત્તિને જ નહીં, પરંતુ 5′→3′એક્સોન્યુક્લિઝ પ્રવૃત્તિને પણ અવરોધિત કરે છે.પ્રિ-ડિનેચ્યુરેશન તાપમાને 30 સેકન્ડ માટે ગરમ કરવાથી એન્ટિબોડી સંપૂર્ણપણે નિષ્ક્રિય થઈ શકે છે અને ડીએનએ પોલિમરેઝ પ્રવૃત્તિ અને એક્સોનોક્લીઝ પ્રવૃત્તિને મુક્ત કરી શકે છે.ડબલ બ્લોકિંગ લાક્ષણિકતા માત્ર અસંગતતા અથવા પ્રાઈમર ડિમરને કારણે થતા બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશનને અસરકારક રીતે અટકાવી શકે છે, પરંતુ પ્રોબ ડિગ્રેડેશનને કારણે ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલના ઘટાડાને પણ અસરકારક રીતે અટકાવી શકે છે, જેથી ઈન વિટ્રો ડિટેક્શન રીએજન્ટને પરિવહન દરમિયાન અથવા રૂમમાં ઉપયોગ દરમિયાન વધુ સ્થિર બનાવી શકાય. તાપમાન
ઘટકો
ઘટક | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
તાક ડીએનએ પોલિમરેઝ(5 U/μL) | 50 μL | 200 μL | 2 એમએલ | 5 એમએલ |
સંગ્રહ સ્થિતિ
ઉત્પાદન સૂકા બરફ સાથે મોકલવામાં આવે છે અને તેને -25°C~-15°C પર 2 વર્ષ માટે સંગ્રહિત કરી શકાય છે.
વિશિષ્ટતાઓ
પોલિમરેઝ | તાક ડીએનએ પોલિમરેઝ |
શુદ્ધતા | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
હોટ સ્ટાર્ટ | બિલ્ટ-ઇન હોટ સ્ટાર્ટ |
પ્રતિક્રિયા ઝડપ | ધોરણ |
Exonuclease પ્રવૃત્તિ | 5′→3′ |
સૂચનાઓ
પ્રતિક્રિયા સેટઅપ
ઘટકો | વોલ્યુમ (μL) | અંતિમ એકાગ્રતા |
2× બફરa | 25 | 1× |
પ્રાઈમર/પ્રોબ મિક્સb | × | 0.1 μmol/L-0.5 μmol/L |
હોટસ્ટાર્ટ ટાક પોલિમરેઝ (5U/μL) | 1.2 | 0.12 U/μL |
ડીએનએ ટેમ્પલેટc | × | 0.1-100 એનજી |
ડીડીએચ2O | 50 સુધી | - |
નોંધો:
1) વિશિષ્ટ પ્રાયોગિક એપ્લિકેશન અનુસાર, તેને અનુરૂપ પ્રતિક્રિયા બફર તૈયાર કરવા માટે જરૂરી છે.
2) ડીએનએની માત્રા અને પ્રોબ અથવા પ્રાઇમર્સની સાંદ્રતાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.શ્રેષ્ઠ એકાગ્રતા ચોક્કસ પ્રાયોગિક પરિસ્થિતિઓ અનુસાર ગોઠવી શકાય છે.
થર્મલ સાયકલિંગ પ્રોટોકોલ
પગલું | તાપમાન(°C) | સમય | સાયકલ |
પ્રિ-ડિનેચરેશન | 95 ℃ | 5 મિનિટ | 1 |
વિકૃતિકરણ | 95 ℃ | 15 સે | 45 |
એનીલિંગ / એક્સ્ટેંશન | 60 ℃a | 30 સેb |
નોંધો:
1) પ્રતિક્રિયા તાપમાન ડિઝાઇન કરેલ પ્રાઇમર્સના Tm મૂલ્ય અનુસાર ગોઠવવામાં આવે છે.
2) વિવિધ qPCR સાધનોને વિવિધ ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલ એક્વિઝિશન સમયની જરૂર છે, કૃપા કરીને ટૂંકી સમય મર્યાદા અનુસાર સેટ કરો.
નોંધો
કૃપા કરીને તમારા સ્વાસ્થ્ય અને સલામતીની ખાતરી કરવા માટે જરૂરી PPE, જેમ કે લેબ કોટ અને મોજા પહેરો!