રેનેસ એ
રિબોન્યુક્લીઝ A(RNaseA) એ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ પોલિપેપ્ટાઈડ છે જેમાં લગભગ 13.7 kDa ના પરમાણુ વજન સાથે 4 ડિસલ્ફાઇડ બોન્ડ્સ છે.RNase Ais એ એન્ડોરીબોન્યુક્લીઝ છે જે ખાસ કરીને C અને U અવશેષો પર સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA ને ડિગ્રેડ કરે છે.ખાસ કરીને, ક્લીવેજ ન્યુક્લિયોટાઇડના 5'-રાઇબોઝ દ્વારા રચાયેલા ફોસ્ફોડિસ્ટર બોન્ડને ઓળખે છે અને નજીકના પાયરિમિડીન ન્યુક્લિયોટાઇડના 3'-રિબોઝ પર ફોસ્ફેટ જૂથને ઓળખે છે, જેથી 2,3'-સાયક્લિક ફોસ્ફેટ્સ હાઇડ્રોલાઇઝ્ડ થાય છે. ન્યુક્લિયોસાઇડ ફોસ્ફેટ્સ (દા.ત., pG-pG-pC-pA-pG ને pG-pG-pCp અને A-PG બનાવવા માટે RNase A દ્વારા ક્લીવ કરવામાં આવે છે).RNase A એ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA ક્લીવિંગ કરવામાં સૌથી વધુ સક્રિય છે.ભલામણ કરેલ કાર્યકારી સાંદ્રતા 1- 100 μG/mL છે, જે વિવિધ પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીઓ સાથે સુસંગત છે.ઓછી મીઠાની સાંદ્રતા (0-100 mM NaCl) નો ઉપયોગ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA, ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA અને RNA-DNA હાઇબ્રિડાઇઝેશન દ્વારા રચાયેલી RNA સાંકળોને કાપવા માટે થઈ શકે છે.
જો કે, ઉચ્ચ મીઠાની સાંદ્રતા પર (≥0.3 M), RNase A માત્ર ખાસ કરીને સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNAને તોડી નાખે છે.
RNase A નો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે પ્લાઝમિડ DNA અથવા જીનોમિક DNA ની તૈયારી દરમિયાન RNA દૂર કરવા માટે થાય છે.તૈયારી પ્રક્રિયા દરમિયાન DNase સક્રિય છે કે નહીં તે પ્રતિક્રિયાને સરળતાથી અસર કરી શકે છે.પાણીના સ્નાનમાં ઉકાળવાની પરંપરાગત પદ્ધતિનો ઉપયોગ DNase પ્રવૃત્તિને નિષ્ક્રિય કરવા માટે થઈ શકે છે.આ પ્રોડક્ટમાં DNase અને પ્રોટીઝ નથી અને ઉપયોગ કરતા પહેલા તેને હીટ ટ્રીટમેન્ટની જરૂર નથી.વધુમાં, આ ઉત્પાદનનો ઉપયોગ મોલેક્યુલર બાયોલોજી પ્રયોગો જેમ કે RNase સંરક્ષણ વિશ્લેષણ અને RNA ક્રમ વિશ્લેષણમાં પણ થઈ શકે છે.
સંગ્રહ શરતો
ઉત્પાદન 2 વર્ષ માટે -25℃~- 15℃ પર સંગ્રહિત હોવું જોઈએ.
વિશિષ્ટતાઓ
| દેખાવ | પાવડર |
| જથ્થો | 100mg/1g |
| ઉત્પાદનો પ્રકાર | RNase A |
સૂચનાઓ
RNase A સ્ટોરેજ સોલ્યુશન તૈયાર કરવા માટેની આ એક સામાન્ય રીત છે.તે પણ તૈયાર કરી શકાય છેપ્રયોગશાળા અથવા સંદર્ભ સાહિત્યમાં પરંપરાગત પદ્ધતિઓ અનુસાર અન્ય પદ્ધતિઓ દ્વારા (જેમ કે10 mM Tris-HCl, pH 7.5 અથવા Tris-NaCl સોલ્યુશનમાં સીધું ઓગળવું)
1. RNase A સ્ટોરેજ સોલ્યુશનના 10 mg/mL તૈયાર કરવા માટે 10 mM સોડિયમ એસિટેટ (pH 5.2) નો ઉપયોગ કરો.
2. 15 મિનિટ માટે 100 ℃ પર ગરમ કરો.
3. ઓરડાના તાપમાને ઠંડુ કરો, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) નું 1/10 વોલ્યુમ ઉમેરો, તેનું pH 7.4 (માટે સમાયોજિત કરો)ઉદાહરણ તરીકે, 500 mL નું 10 mg/mL RNase સ્ટોરેજ સોલ્યુશન 1 M Tris-HCl, pH7.4 ઉમેરો.
4. સ્થિર સ્ટોરેજ માટે -20℃ પર સબ-પેકેજ, જે 2 વર્ષ સુધી સ્થિર રહી શકે છે.
[નોંધો]:
જ્યારે RNaseA દ્રાવણને તટસ્થ સ્થિતિમાં ઉકાળવામાં આવે છે, ત્યારે RNase અવક્ષેપ રચાશે;તેને નીચા પીએચ પર ઉકાળો, અને જો ત્યાં વરસાદ હોય, તો તે અવલોકન કરી શકાય છે, જે પ્રોટીન અશુદ્ધિઓની હાજરીને કારણે થઈ શકે છે.જો ઉકળતા પછી કાંપ મળી આવે, તો હાઇ-સ્પીડ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન (13000rpm) દ્વારા અશુદ્ધિઓ દૂર કરી શકાય છે, અને પછી ફ્રીઝિંગ સ્ટોરેજ માટે સબ-પેક કરી શકાય છે.
નોંધો
કૃપા કરીને તમારા સ્વાસ્થ્ય અને સલામતીની ખાતરી કરવા માટે જરૂરી PPE, જેમ કે લેબ કોટ અને મોજા પહેરો.
