રેનેસ એ
રિબોન્યુક્લીઝ A (RNaseA) એ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ પોલીપેપ્ટાઈડ છે જેમાં લગભગ 13.7 kDa ના પરમાણુ વજન સાથે 4 ડિસલ્ફાઇડ બોન્ડ્સ છે.RNase A એ એન્ડોરીબોન્યુક્લીઝ છે જે ખાસ કરીને C અને U અવશેષો પર સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA ને ડિગ્રેડ કરે છે.ખાસ કરીને, ક્લીવેજ એ ન્યુક્લિયોટાઇડના 5′-રાઈબોઝ દ્વારા રચાયેલા ફોસ્ફોડિસ્ટર બોન્ડને ઓળખે છે અને નજીકના પાયરિમિડીન ન્યુક્લિયોટાઈડના 3′-રાઈબોઝ પર ફોસ્ફેટ જૂથ બનાવે છે, જેથી 2, 3′-સાયક્લિક ફોસ્ફોસ્ફેટ્સ 3′-ચક્રીય ફોસ્ફોસ્ફેટ્સ સાથે જોડાય છે. ′ન્યુક્લિયોસાઇડ ફોસ્ફેટ્સ (દા.ત. pG-pG-pC-pA-pG ને pG-pG-pCp અને A-PG બનાવવા માટે RNase A દ્વારા ક્લીવ કરવામાં આવે છે).RNase A એ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA ક્લીવિંગ કરવામાં સૌથી વધુ સક્રિય છે.ભલામણ કરેલ કાર્યકારી સાંદ્રતા 1-100μG/mL છે, જે વિવિધ પ્રતિક્રિયા પ્રણાલીઓ સાથે સુસંગત છે.ઓછી મીઠાની સાંદ્રતા (0-100 mM NaCl) નો ઉપયોગ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA, ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNA અને RNA-DNA હાઇબ્રિડાઇઝેશન દ્વારા રચાયેલી RNA સાંકળોને કાપવા માટે થઈ શકે છે.જો કે, ઉચ્ચ મીઠાની સાંદ્રતા (≥0.3 M), RNase A માત્ર ખાસ કરીને સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ RNAને તોડી નાખે છે.
RNase A નો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે પ્લાઝમિડ DNA અથવા જીનોમિક DNA ની તૈયારી દરમિયાન RNA ને દૂર કરવા માટે થાય છે. તૈયારી પ્રક્રિયા દરમિયાન DNase સક્રિય હોય કે ન હોય તે પ્રતિક્રિયાને સરળતાથી અસર કરી શકે છે.પાણીના સ્નાનમાં ઉકાળવાની પરંપરાગત પદ્ધતિનો ઉપયોગ DNase પ્રવૃત્તિને નિષ્ક્રિય કરવા માટે થઈ શકે છે.આ પ્રોડક્ટમાં DNase અને પ્રોટીઝ નથી અને ઉપયોગ કરતા પહેલા તેને હીટ ટ્રીટમેન્ટની જરૂર નથી.વધુમાં, આ ઉત્પાદનનો ઉપયોગ મોલેક્યુલર બાયોલોજી પ્રયોગો જેમ કે RNase સંરક્ષણ વિશ્લેષણ અને RNA ક્રમ વિશ્લેષણમાં પણ થઈ શકે છે.
સંગ્રહ શરતો
ઉત્પાદન -25～-15℃ પર સ્ટોર કરી શકાય છે, જે 2 વર્ષ માટે માન્ય છે.
સૂચનાઓ
RNase A સ્ટોરેજ સોલ્યુશન તૈયાર કરવા માટેની આ એક સામાન્ય રીત છે.દ્વારા પણ તૈયાર કરી શકાય છેપ્રયોગશાળા અથવા સંદર્ભ સાહિત્યમાં પરંપરાગત પદ્ધતિઓ અનુસાર અન્ય પદ્ધતિઓ (જેમ કે10 mM Tris-HCl, pH 7.5 અથવા Tris-NaCl સોલ્યુશનમાં સીધું ઓગળવું)
1. RNase A સ્ટોરેજ સોલ્યુશનના 10 mg/mL તૈયાર કરવા માટે 10 mM સોડિયમ એસીટેટ (pH 5.2) નો ઉપયોગ કરો
2. 15 મિનિટ માટે 100 ℃ પર ગરમ કરો
3. ઓરડાના તાપમાને ઠંડુ કરો, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) નું 1/10 વોલ્યુમ ઉમેરો, તેનું pH 7.4 (માટે સમાયોજિત કરો)ઉદાહરણ તરીકે, 500 મિલી 10g/ml RNase સ્ટોરેજ સોલ્યુશન 1M Tris-HCL, PH7.4 ઉમેરો)
4. સ્થિર સ્ટોરેજ માટે -20℃ પર સબ-પેકેજ, જે 2 વર્ષ સુધી સ્થિર રહી શકે છે.
[નોંધો]: જ્યારે તટસ્થ પરિસ્થિતિમાં RNaseA દ્રાવણને ઉકાળવામાં આવે છે, ત્યારે RNase અવક્ષેપ બનશે;તેને નીચા પીએચ પર ઉકાળો, અને જો ત્યાં વરસાદ હોય, તો તે અવલોકન કરી શકાય છે, જે પ્રોટીન અશુદ્ધિઓની હાજરીને કારણે થઈ શકે છે.જો ઉકળતા પછી કાંપ મળી આવે, તો હાઇ-સ્પીડ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન (13000rpm) દ્વારા અશુદ્ધિઓ દૂર કરી શકાય છે, અને પછી ફ્રીઝિંગ સ્ટોરેજ માટે સબ-પેક કરી શકાય છે.
ઉત્પાદન માહિતી
| સમાનાર્થી | રિબોન્યુક્લીઝ I;સ્વાદુપિંડનું રિબોન્યુક્લીઝ;રિબોન્યુક્લીઝ 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;એન્ડોરીબોન્યુલસીઝ I |
| CAS નં. | 9001-99-4 |
| દેખાવ | સફેદ lyophilized પાવડર |
| મોલેક્યુલર વજન | ~ 13.7kDa (એમિનો એસિડ ક્રમ) |
| પીએચ મૂલ્ય | 7.6 (પ્રવૃત્તિ શ્રેણી 6-10) |
| યોગ્ય તાપમાન | 60℃ (પ્રવૃત્તિ શ્રેણી 15-70℃) |
| સક્રિય એજન્ટ | Na2+.કે+ |
| અવરોધક | Rnase અવરોધક |
| નિષ્ક્રિયકરણ પદ્ધતિ | હીટિંગ દ્વારા નિષ્ક્રિય કરી શકાતું નથી, સેન્ટ્રીફ્યુજ કૉલમનો ઉપયોગ કરવાનું સૂચન કરવામાં આવે છે |
| મૂળ | બોવાઇન |
| દ્રાવ્યતા | પાણીમાં દ્રાવ્ય (10mg/ml) |
| શુષ્ક પર નુકશાન | ≤5.0% |
| એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ | ≥60 કુનિટ્ઝ એકમો/એમજી |
| આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ | 9.6 |
નોંધો
તમારી સલામતી અને સ્વાસ્થ્ય માટે, કૃપા કરીને ઓપરેશન માટે લેબ કોટ્સ અને નિકાલજોગ ગ્લોવ્ઝ પહેરો.
