UDG/UNG ઉત્સેચકો
UDG(uracil DNA glycosylase) ssDNA અને dsDNA માં uracil આધાર અને સુગર-ફોસ્ફેટ બેકબોન વચ્ચે N-glycosidic લિંકના હાઇડ્રોલિસિસને ઉત્પ્રેરિત કરી શકે છે.તે એરોસોલ પ્રદૂષણને સરળતાથી નિયંત્રિત કરી શકે છે અને PCR, qPCR, RT-qPCR અને LAMP જેવી સામાન્ય મોલેક્યુલર બાયોલોજી સિસ્ટમ માટે યોગ્ય છે.
વિશિષ્ટતાઓ
| અભિવ્યક્તિ યજમાન | રિકોમ્બિનન્ટ ઇ. કોલીવિથ યુરેસિલ ડીએનએ ગ્લાયકોસીલેઝ જનીન |
| મોલેક્યુલર વજન | 24. 8kDa |
| શુદ્ધતા | ≥95% (SDS-PAGE) |
| ગરમી નિષ્ક્રિયતા | 95℃, 5~10 મિનિટ |
| એકમ વ્યાખ્યા | એક એકમ (U) એ એન્ઝાઇમની માત્રા તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવે છે જે 25℃ પર 30 મિનિટમાં l μg dU- ધરાવતા dsDNA ના હાઇડ્રોલિસિસને ઉત્પ્રેરિત કરવા માટે જરૂરી છે. |
સંગ્રહ
ઉત્પાદનને -25℃~-15°C તાપમાને બે વર્ષ માટે સંગ્રહિત કરવું જોઈએ.
સૂચનાઓ
1.નીચેની સિસ્ટમ અનુસાર પીસીઆર પ્રતિક્રિયા મિશ્રણની તૈયારી
| ઘટકો | વોલ્યુમ (μL) | અંતિમ એકાગ્રતા |
| 10×PCR બફર (Mg²+પ્લસ) | 5 | 1× |
| 25 mmol/LMgCl | 3 | 1.5 mmol/L |
| dUTP(10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol/L |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/લીચ) | 1 | 0.2 એમએમઓએલ/લીચ |
| ટેમ્પલેટ ડીએનએ | X | - |
| પ્રાઈમર1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| પ્રાઈમર 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Taq DNA પોલિમરેઝ (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
| યુરેસિલ ડીએનએ ગ્લાયકોસીલેઝ (UDG/UNG), 1 U/μL | 1 | 1 U/μL |
| ddH₂O | 50 સુધી | - |
નૉૅધ: પ્રાયોગિક જરૂરિયાતો અનુસાર, dUTP ની અંતિમ સાંદ્રતા 0.2-0.6 mmol/L વચ્ચે ગોઠવી શકાય છે, અને 0.2 mmol/L dTTP પસંદગીપૂર્વક ઉમેરી શકાય છે.
2.એમ્પ્લીફિકેશન પ્રક્રિયા
| સાયકલ પગલું | તાપમાન | સમય | સાયકલ |
| dU-સમાવતી ટેમ્પલેટ ડિગ્રેડેશન | 25℃ | 10 મિનિટ | 1 |
| UDG સક્રિયકરણ, ટેમ્પલેટ પ્રારંભિક વિકૃતિકરણ | 95℃ | 5~10 મિનિટ | 1 |
| વિકૃતિકરણ | 95℃ | 10 સે |
30-35 |
| એનેલીંગ | 60℃ | 20 સે | |
| વિસ્તરણ | 72℃ | 30 સેકન્ડ/કેબી | |
| અંતિમ વિસ્તરણ | 72℃ | 5 મિનિટ | 1 |
નૉૅધ: 25°C પર પ્રતિક્રિયા સમય પ્રાયોગિક જરૂરિયાતો અનુસાર 5-10 મિનિટની અંદર ગોઠવી શકાય છે.
નોંધો
1.UDG મોટાભાગના પીસીઆર પ્રતિક્રિયા બફર્સમાં સક્રિય છે.
2.જ્યારે ઉપયોગ કરવામાં આવે ત્યારે ઉત્સેચકોને આઈસબૉક્સમાં અથવા બરફના સ્નાનમાં સંગ્રહિત કરવા જોઈએ, અને ઉપયોગ પછી તરત જ -20 ° સે પર સંગ્રહિત થવો જોઈએ.
3.કૃપા કરીને તમારા સ્વાસ્થ્ય અને સલામતીની ખાતરી કરવા માટે જરૂરી PPE, જેમ કે લેબ કોટ અને મોજા પહેરો!
