વન સ્ટેપ RT-qPCR SYBR ગ્રીન પ્રિમિક્સ
કેટ નંબર: HCB5140A
વન સ્ટેપ RT-qPCR સાયબર ગ્રીન પ્રિમિક્સ એ SYBR ગ્રીન I ડાય પર આધારિત ફ્લોરોસેન્સ ક્વોન્ટિફિકેશન માટે છે.જનીન-વિશિષ્ટ પ્રાઇમર્સનો ઉપયોગ કરીને, રિવર્સ ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન અને qPCR પ્રતિક્રિયાઓ એક ટ્યુબમાં પૂર્ણ થાય છે, વારંવાર કેપ-ઓપનિંગ અને પાઇપિંગ કામગીરીની જરૂરિયાતને દૂર કરે છે, એસે કાર્યક્ષમતામાં મોટા પ્રમાણમાં સુધારો કરે છે અને દૂષણનું જોખમ ઘટાડે છે.આરએનએ નમૂનાઓ માટે, કીટ કાર્યક્ષમ સીડીએનએ સંશ્લેષણ માટે હીટ-રેઝિસ્ટન્ટ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેસ અને માત્રાત્મક એમ્પ્લીફિકેશન માટે હોટસ્ટાર્ટ ટાક ડીએનએ પોલિમરેઝનો ઉપયોગ કરે છે.ઑપ્ટિમાઇઝ બફર સિસ્ટમ હેઠળ, કીટની સંવેદનશીલતા અત્યંત વ્યક્ત લક્ષ્યો માટે 0.1 pg જેટલી અને સાધારણ રીતે વ્યક્ત લક્ષ્યો માટે 1 pg જેટલી ઊંચી હોઈ શકે છે.આ કીટ ડીએનએ સેમ્પલના એમ્પ્લીફિકેશન અને પ્રમાણીકરણ માટે યોગ્ય છે.તે વિવિધ છોડ અને પ્રાણીઓના નમૂનાઓ, કોષો અને સુક્ષ્મસજીવોમાંથી ન્યુક્લીક એસિડની સંવેદનશીલ તપાસ અને પ્રમાણીકરણને સક્ષમ કરે છે.
ઘટકો
| No | નામ | વોલ્યુમ | વોલ્યુમ |
| 1 | અદ્યતન બફર | 250 μL | 2×1.25 એમએલ |
| 2 | એડવાન્સ્ડ એન્ઝાઇમ મિક્સ | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase ફ્રી એચ2O | 250 μL | 2×1.25 એમએલ |
સંગ્રહ શરતો
આ ઉત્પાદન 1 વર્ષ માટે પ્રકાશથી દૂર -25~-15℃ પર સંગ્રહિત હોવું જોઈએ.
સૂચનાઓ
1. પ્રતિક્રિયા સિસ્ટમ રૂપરેખાંકનd
| ઘટકો | વોલ્યુમ (μL) | વોલ્યુમ (μL) | અંતિમ એકાગ્રતા |
| અદ્યતન બફર | 12.5 | 25 | 1× |
| એડવાન્સ્ડ એન્ઝાઇમ મિક્સ | 1 | 2 | - |
| ફોરવર્ડ પ્રાઈમર (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| રિવર્સ પ્રાઈમર (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| આરએનએ ટેમ્પલેટb | X | X | - |
| RNase ફ્રી એચ2ઓc | 25 થી | 50 થી | - |
નોંધો:
1) એ.ટીતેની અંતિમ પ્રાઈમર સાંદ્રતા 0.2 μmol/L હતી, જે યોગ્ય તરીકે 0.1 અને 1μmol/L વચ્ચે પણ ગોઠવી શકાય છે.
2) બી.રીએજન્ટ અત્યંત સંવેદનશીલ છે, કુલ RNA 1pg-1μg ની રેન્જમાં છે, અને માનવ નમૂનાઓના પરીક્ષણમાં 1 pg-100 ng નું શ્રેષ્ઠ ઇનપુટ જોવા મળ્યું છે, જે યોગ્ય તરીકે 15-30 ની રેન્જમાં એકંદર Ct મૂલ્યને નિયંત્રિત કરે છે.
3) સી.લક્ષ્ય જનીન એમ્પ્લીફિકેશનની માન્યતા અને પુનઃઉત્પાદનક્ષમતા સુનિશ્ચિત કરવા માટે 20μL અથવા 50μL નો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.
4) ડી.કૃપા કરીને અલ્ટ્રા-ક્લીન બેન્ચમાં તૈયાર કરો અને ન્યુક્લિઝ રેસિડ્યુ-ફ્રી ટીપ્સ અને પ્રતિક્રિયા ટ્યુબનો ઉપયોગ કરો;ફિલ્ટર કારતુસ સાથેની ટીપ્સની ભલામણ કરવામાં આવે છે.ક્રોસ દૂષણ અને એરોસોલ દૂષણ ટાળો.
2.પ્રતિક્રિયા કાર્યક્રમ
| સાયકલ પગલું | ટેમ્પ. | સમય | સાયકલ |
| રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન | 50℃a | 6 મિનિટ | 1 |
| પ્રારંભિક વિકૃતિકરણ | 95℃ | 5 મિનિટ | 1 |
| એમ્પ્લીફિકેશન પ્રતિક્રિયા | 95℃ | 15 સે | 40 |
| 60℃b | 30 સે | ||
| મેલ્ટિંગ કર્વ સ્ટેજ | ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ ડિફોલ્ટ્સ | 1 | |
નોંધો:
1) એ.રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન તાપમાન પ્રાયોગિક જરૂરિયાતો અનુસાર 50-55°C વચ્ચે પસંદ કરી શકાય છે.ડીએનએ નમૂનાઓ માટે, રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન પ્રક્રિયાને અવગણી શકાય છે.
2) બી.ખાસ કિસ્સાઓમાં, એનિલિંગ/એક્સ્ટેંશન તાપમાનને પ્રાઈમર Tm મૂલ્ય અનુસાર ગોઠવી શકાય છે, 60°Cની ભલામણ કરવામાં આવે છે.
નોંધો
1. આ ઉત્પાદન માત્ર સંશોધન ઉપયોગ માટે છે.
2. કૃપા કરીને તમારી સલામતી માટે, લેબ કોટ્સ અને નિકાલજોગ ગ્લોવ્સ સાથે કામ કરો.
